什么是相襯顯微鏡?
使用常規(guī)的生物顯微鏡,很難觀察到無色透明細胞的存活狀態(tài)。相襯顯微鏡通過利用光的兩個特征(衍射和干涉),可以根據(jù)亮度差(對比度)可視化樣本。
原理
對于諸如正弦波之類的周期性運動,相位表示波相對于原點經(jīng)過的部分。光也是一種振蕩,當通過物體時,相位會在通過的光(衍射光)和其余的光(直接光)之間發(fā)生變化。即使物體是無色透明的,當光線穿過時,相位仍然會發(fā)生變化。該相襯被轉(zhuǎn)換成亮度差以觀察樣品。
特征
可以觀察到透明細胞而不會弄臟它們,因為相襯可以轉(zhuǎn)換為亮度差異。
由于不必對細胞染色,因此可以在活著的狀態(tài)下觀察到細胞分裂和其他過程。
結(jié)構(gòu)體
因為衍射光太弱而不能被眼睛正常觀察到,所以相位板位于物鏡和像面之間的光焦點處,從而僅直接光的相位改變。這會在圖像表面產(chǎn)生對比度。
結(jié)構(gòu)特征包括會聚透鏡的焦平面上的環(huán)形光圈,而不是針孔,以及物鏡的后焦平面上的相位板。