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相襯顯微鏡

  • 這是一種光學(xué)顯微鏡,在光穿透到未染色的樣品期間會發(fā)生小小的光偏差,即相移。這些相移會轉(zhuǎn)換為圖像,意味著當(dāng)光線通過不透明的樣品時,相移會使樣品變亮,從而在背景中形成照明(明亮)的圖像。
  • 當(dāng)使用透明標(biāo)本時,相襯顯微鏡會產(chǎn)生高對比度的圖像,因此微生物培養(yǎng)物,薄組織碎片,細(xì)胞組織和亞細(xì)胞顆粒的圖像更是如此。
  • 相襯顯微鏡工作背后的原理是使用光學(xué)方法將標(biāo)本轉(zhuǎn)換為振幅圖像,該圖像由顯微鏡的目鏡觀察。
  • PCM可用于查看未染色的細(xì)胞(也稱為相對象),這意味著可以維持細(xì)胞的形態(tài),并且可以以自然狀態(tài),高對比度和有效清晰度觀察細(xì)胞。這是因為,如果標(biāo)本被染色并固定,它們會殺死大多數(shù)細(xì)胞,而明場光學(xué)顯微鏡卻無法消除這種特征。
  • 在光穿透過程中發(fā)生的偏移會轉(zhuǎn)換為幅度變化,從而引起圖像對比度。
  • 結(jié)合增強(qiáng)對比度的元素(例如熒光),它們可以更好地呈現(xiàn)標(biāo)本圖像。

相襯顯微鏡的零件

相襯顯微鏡的儀器基于從接收光源到圖像可視化的光路。

因此,其順序組成為:

  • 光源(水銀弧光燈)
  • 集體鏡頭
  • 光圈
  • 冷凝器
  • 環(huán)形冷凝器
  • 標(biāo)本
  • 目的
  • 相板
  • 偏光
  • 相環(huán)

相襯顯微鏡的功能

  • 由偏離的散射(偏轉(zhuǎn))光和到達(dá)被吸收的樣品的不偏離光引起的變化在一定波長處產(chǎn)生并產(chǎn)生顏色。由散射光和吸收光產(chǎn)生的差異稱為振幅變化。這些幅度變化很敏感,因此無法通過相差顯微鏡之類的照相設(shè)備進(jìn)行可視化,因此人眼即可看到。
  • 相襯顯微鏡的聚光鏡有一個不透明的圓盤,稱為圓環(huán),而透明的圓環(huán)會產(chǎn)生一個穿過樣品的光錐。由于光的變化,由于光密度的變化而導(dǎo)致樣品上的一些光彎曲,從而在物鏡上形成圖像。無偏離的光將撞擊相板上的相環(huán),而偏離的光將錯過直接通過相板的相環(huán),從而形成圖像。

相差顯微鏡設(shè)計有物鏡,當(dāng)與對比度增強(qiáng)技術(shù)(例如熒光)結(jié)合使用時,物鏡可以執(zhí)行多種功能。物鏡位于內(nèi)部相板中,其光吸收和相位移(即未衍射)會發(fā)生變化,從而形成了一個寬廣的光譜以對比樣品并在背景中形成強(qiáng)烈的對比度。

相襯顯微鏡的應(yīng)用

  • 確定活細(xì)胞的形態(tài),例如動植物細(xì)胞
  • 研究微生物的運動能力和運動結(jié)構(gòu)
  • 檢測某些微生物元素,例如細(xì)菌內(nèi)生孢子